HBV标志物的检测方法

20110408

目前常用的HBV血清学流行病学调查标志有HBsAg、抗一HBc—IgM、抗一HBc—IgG、HBeAg和抗一HBs。HBcAg只存在于感染的肝细胞内，在血中一般检测不到。

目前常采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法、酶免疫法(EIA)、放射免疫法(RIA)、微粒子酶免疫分析法(MEIA)或化学发光法等检测。

HBV标志物检测方法

ELISA法检测，要求使用符合质控标准的试剂盒。检测HBsAg具体操作步骤如下。

1)配液将30ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释至600ml备用。

2)编号将样品对应微孔按顺序编号，每板应设阴、阳性对照各2孔和空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步相同)。

3)加样分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照50斗l。

4)加酶每孔加入酶标试剂I滴(50斗1)，轻轻振荡混匀。

5)温育用封板膜封板后置37℃温育60min。

6)洗涤将孔内液体甩干，用洗涤液充分洗涤5次，拍干。

7)显色每孔加入显色剂A、B液各1滴(50汕1)，轻轻振荡混匀，37qC避光显色15rain。

8)测定每孔加入终止液1滴(50Ixl)，轻轻振荡混匀，设定酶标仪波长于450nm处(建议用双波长450／630nm检测)，用空白孔调零点后测定各孔OD值。（责任编辑：杰瑞）