肝细胞实验
观察细胞器与内含物
线粒体、溶酶体和过氧化物酶体丰富
线粒体——示教:3号片
→胆小管面
小狗胰脏,Regaud氏液固定,石蜡切片,铁苏木素染色。
EM(电镜):(1)有三种功能面→血窦面
猪肝,Bouin氏液固定,石蜡切片,HE染色.
线粒体用铁苏木素染色呈黑色,分布于核周围的细胞质中,线粒体在高倍镜下呈粒状、线状或短棒状,或直或曲,轮廓鲜明。
高尔基复合体:参与蛋白的加工和胆汁排泌
在切片上有大小不一的圆形脊神经节细胞,胞核不着色,但能看到淡黄色的核仁。核周围的细胞质中有镀染成黑色的网状或颗粒状物,即光镜下的高尔基复合体。
胰脏的分泌细胞呈锥形,核大而圆,位于细胞中央,细胞游离端聚集有许多大而圆的黑色颗粒为分泌颗粒。
(2)细胞器发达
肝细胞:68号切片
在高倍镜下,肝细胞中可见到大量紫红色的糖元颗粒或小块,在很多肝细胞中,糖元偏于细胞一侧,此系制片过程造成,生活状态时分布较均匀。
低倍镜下找到呈多边形的肝小叶,选择一个肝小叶换高倍镜观察,可见到呈索状排列的肝细胞,呈多边形,有1-2个圆形细胞核,核仁明显,核膜清楚,核内染色质稀疏,染色较浅
细胞器与内含物的种类很多,实验课仅观察几种主要的细胞器和内含物在光镜下的形态和位置。各种细胞器和内含物,在一般的HE染色的切片上看不到,须用特殊方法染色显示。
滑面内质网:参与生物转化和代谢,如胆汁合成、脂类代谢、糖代谢、激素代谢和有机异物的转化
高尔基复合体——示教:2号片
粗面内质网:合成白蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原、脂蛋白和补体等血浆蛋白
狗或猪的脊神经节,Golgi氏亚砷酸硝酸银法镀染。
肝细胞
(3)含糖原、脂滴、色素等内涵物
糖元——示教:6号片
LM(光镜):多面体形;核大而圆,居中,常染色质丰富,部分有双核或多倍体核;胞质嗜酸性,含弥散分布的嗜碱性团块
→细胞连接面:有紧密连接、桥粒、缝隙连接
猪肝,冷Carnoy氏液固定,PAS反应法显示糖元,苏木素复染胞核。
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